嗎啉基氨基的生物活性實驗。將腫瘤細胞傳代，收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100μL，鋪板使待測細胞調密度至5000cell/孔。將培養板移入CO2孵箱中，在37℃、5%CO2及飽和濕度條件下培養，至細胞單層鋪滿孔底，加入濃度梯度的藥物，藥物梯度稀釋5個濃度，每孔加入20μLMTT溶液（5mg·mL－1，及 0.5%MTT），繼續培養3～4h。待細胞呈色後終止培養，小心吸去孔內培養液。加入150μLDMSO，置搖床上低速振動10min，使結晶物充分溶解。
在酶聯免疫檢測儀570nm 處測量各孔OD值。將所有原始數據（OD值）進行標準差（SD）分析，以各組均值替換偏差較大數據，計算出抑製率，根據藥物濃度及對應抑製率應用專門軟件得出IC50值。結果與討論2.1
目標產物設計和合成 根據索拉菲尼的結構特征，以它為先導化合物，對其結構進行了改造，一共改造了3處取代的位置，即 Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3，並且 3
處取代的位置又選擇了不同的取代基。
通過相互組合後，一共設計出了26個目標化合物。對於這26個目標化合物，采用通用的實驗方法，都合成出來了，但合成收率有所差異，主要是由於不同取代基的影響。整體而言，Ｒ1對實驗的影響比較小，而Ｒ2、Ｒ3對實驗結果的影響較大。
生物活性檢測生物實驗過程中，采用 MTT法檢測目標產物對人肺癌細胞（H1975 和
A549）、人宮頸癌細胞（Hela）增殖的抑製活性。采用的陽性對照藥
物為索拉菲尼和舒尼替尼（Sunitinib），整體而言，其抗腫瘤的抑製活性都比較好，但還是存在部分差異，主要是因為取代基的不同，導致藥物跟受體的結合能力不同所致的。可以看出，化合物
1－3、1－4、1－7、1－8、1－13、1－14、1－25、1－26 對人宮頸癌細胞增殖的抑製活性比較好，IC50＜4。22
μmol·L－1，為有效作用。化合物 1－11、1－12、1－19、1－20、1－21、1－22
對人肺癌細胞H1975和的抑製活性較好，IC50＜4.45μmol·L－1，同樣為有效作用，其他幾個目標化合物抑製活性良好。
初步構效關係研究表明，該類目標化合物對 VEGFＲ 2 有一定的抑製作用，但不同 Ｒ2和
Ｒ3，其抑製作用有一定區別。其中含氮原子少的化合物對人宮頸癌細胞增殖的抑製活性較好，而含氮原子多的化合物對人肺癌細胞（H1975和A549）增殖的抑製活性要好些。原因在於含氮少的化合物更容易作用於人宮頸癌細胞，反之則更容易作用於人肺癌細胞。